猪瘟抗体试剂盒的检测步骤2019-01-05

    2018年非洲猪瘟疫情是指非洲猪瘟疫情在2018年的传播情况。2018年8月1日，辽宁省沈阳市沈北新区某养殖户的生猪发生疑似非洲猪瘟疫情，8月3日11时，经国家参考实验室确诊，为中国首次发现该疫情。

    因为我国的边境线长，国际交流频繁，境外疫情传入风险持续增大，而居民普遍喜食热鲜肉，这就造成了大量生猪长途调运，同时车辆的消毒和经纪人的管理没有跟上，由此引发疫情。其中，生猪养殖中小散户的数量还很庞大。这些散养户生物安全条件差、措施不到位，且多有用餐厨剩余物（泔水）喂猪的习惯，传入疫情的风险较高。造成了现如今大家谈肉色变的局面。

    为了制止这种情况继续蔓延下去，农业农村部在近日下达了对猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知，里面强调各地要加强对生猪及其产品的检测和监管，确保产品质量符合要求。

    那么在生猪及其产品面市之前，养殖户们应该怎么做呢？

    主要是进行两个方面的检测，一是用猪瘟试剂盒检测病毒，二是用猪瘟抗体试剂盒检测是否有病毒抗体。

    主要步骤是：

    1.准备好试剂盒，测试前将试剂盒组份置于室温（18-25℃）平衡30分钟，测试后应立即放回2-8℃保存。

    2.洗涤液：将浓缩洗液按照20倍比例用蒸馏水稀释，混匀后备用。

    3.样品准备：按照常规方法制备血清，用试剂盒中配套的稀释液稀释，样品按照1：60稀释。（比如：5?l样品加入到295?l样品稀释液中）

    4.取出所需要的板条。剩余的板条装入自封袋中，置于2-8℃保存。

    5.先向每孔中加入100?l稀释后的待测样品、阴性质控（样品稀释液）、阳性质控（不稀释），其中阴性质控重复加两孔，阳性质控重复加两孔。

    6.轻轻震动10-20秒混匀，贴上板贴。

    7.置于37℃水浴锅中温育30分钟。扣除孔中液体，并用洗液洗涤5-7次。在干净的纸巾或毛巾上拍干，尽量去除残留的水分。

    8.每孔中加入100?l的酶标记物，轻轻震动10-20秒混匀，贴上板贴。

    9.每孔依次加入50?l底物A和50?l底物B，轻轻震动10-20秒，置于37℃，避光反应15分钟。

    10.每孔加入50?l终止液，轻轻震动几次混匀。使蓝色液体完全变为黄色液体。

    11.在10分钟内，测量450nm处的吸光度（OD450）。

    然后再根据检测结果来判断养殖的生猪及其产品是否有携带猪瘟病毒。