酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA）是免疫学和分子生物学中广泛使用的实验室技术，由Eva Engvall和 Peter Perlmann 于1971年首次描述。该测定依赖于抗原-抗体相互作用的原理，并利用酶和比色检测来量化目标分子，主要用于检测和量化生物样品中特定蛋白质、肽、抗体或抗原的存在。ELISA测定通常应用于各个领域，包括临床诊断、药物研究和生命科学基础研究。
ELISA检测中对照的选择对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。以下是ELISA检测中常用的对照类型及其作用：
空白对照（Blank Control）：
目的：提供背景信号参考，确保读取值表示样品中的分析物浓度。
定义：空白对照是一种常见的阴性对照类型，用于检测实验的“本底”高不高。它不含有任何液体或未见液体的空孔，或仅包含检测缓冲液。
作用：帮助分析塑料和缓冲液的背景吸光度对信号的贡献，通常用于校正背景吸收的变化。
阴性对照（Negative Control）：
目的：验证实验结果中没有假阳性，并检测非特异性结合和假阳性结果。
定义：阴性对照是指不含目标蛋白的样品，如已知不表达目标蛋白的样本。
作用：通过与阳性对照对比，确认实验过程无误且有效，确保阴性结果的真实性。
阳性对照（Positive Control）：
目的：确保实验过程有效，验证试剂盒和实验方法的准确性。
定义：阳性对照是已知含有目标蛋白的内源性可溶样品，或已知含有检测抗体免疫原的纯化蛋白或多肽。
作用：当样品检测结果为阴性时，阳性对照的阳性结果表明实验过程正确，实验的阴性结果是真实的。
样本基质中的标准品（Sample Matrix Standard）：
目的：评估特定样品基质中分析物的检测性能。
定义：在ELISA中，标准品通常用正常稀释缓冲液稀释，但也可以使用检测的种属血清来稀释标准品，以模拟实际样品基质。
作用：提供关于某种特殊样品基质中分析物发现程度的信息，确保检测性能。
标准品（Standard Curve）：
目的：用于建立标准曲线，以便定量分析样品中的目标蛋白浓度。
定义：标准品是含有已知浓度的目标蛋白的样品，用于创建标准曲线。
作用：通过标准品的检测结果，可以计算出样品中的目标蛋白浓度。
S0阴性对照（S0 Negative Control）：
目的：确定在没有分析物的情况下最大的背景信号。
定义：不含标准品或样品，但添加了成功着色反应所需的所有其他成分。
作用：通过这种对照可以控制高非特异性背景的来源，并消除方法，如洗涤步骤、抗体稀释等。
非特异性结合（NSB）对照：
目的：确定由于共轭酶的非特异性结合而产生的背景。
定义：在没有捕获抗体和样品或标准分析物的情况下分析非特异性结合。
作用：获得的非特异性本底通常用于计算所有其他对照、样品和标准品的非特异性本底校正值。
以上这些对照的使用有助于确保ELISA实验的准确性和可靠性，通过对比不同对照的结果，可以有效排除实验误差，提高检测结果的可信度。
