小鼠单克隆抗体Ig类/亚类/亚型鉴定ELISA试剂盒使用方法2025-05-13

小鼠单克隆抗体Ig类/亚类/亚型鉴定ELISA试剂盒用途用于鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克隆抗体或特异亲和纯化单克隆抗体的类和亚类（可区分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda）。

试剂组份：

使用方法：
1、首先将试剂盒恢复室温（大约30分），然后用纯水把清洗液配成工作浓度（一份浓缩清洗液加19份纯水）。

2、取出酶标板。每个标本需要8孔，阳性对照8孔，阴性对照8孔。多余的用自封袋保存，记得放入干燥剂。

3、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各50μl。然后将50μl细胞培养上清（或特异亲和纯化的抗体）再加入酶标微孔板，每个标本加8孔；阳性对照和阴性对照各8孔每孔100μl此处不加标本稀释液。贴上封板膜37℃温育30分钟。

4、弃去板内液体，手工洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干（或机洗5遍）。再在每个标本的6孔中分别加入8种 酶标二抗各100μl，通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

5、吸弃板内液体，手工洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干（或机洗5遍）。每孔分别加入显色剂A和显色剂B各50μl，换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

6、本试剂盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的Ig类或亚类。更可将反应终止液（每孔50μl）终止反应后用酶标仪450nm测定波长，630nm参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的Ig类或亚类亚型(阳性对照OD一般不小于0.8，阴性对照一般不高于0.15，阳性判定标准：样品OD大于阴性OD+0.15，阴性OD低于0.05按0.05算)。