抗体稳定性是确保抗体在不同条件和时间下保持其生物学活性和功能的关键因素。所有抗体在室温、37℃保存与-20℃保存具有一样的活性与稳定性。评估抗体在4℃下保质期(或活性半衰期)的重要实验之一。当然，并不是说一个抗体的保质期为一年，它的4℃活性半衰期就是1年。甚至，一些抗体存放3年以上，仍然保持着良好的活性。
一、抗体稳定性的检测:
1. 长期实验
定义：将抗体存放在实际保存温度，每隔一段时间（如2个月）取出检测其活性、纯度、浓度等特性，直至抗体不再具有相应产品特性。
目的：确定抗体的有效使用和保存期限。
2. 加速稳定实验
定义：将抗体放入高温存储条件（如室温、37℃），在不同时间点检测其特性，一般1天检测一次。
推算：根据高温下失活的期限推算实际存放条件下的保存期限。
3. 反复冻融
定义：通过反复冻融来检测抗体的稳定性，每次冻融后检测其特性，直至失活。
重要性：模拟运输过程中的温度变化，确保抗体在运输过程中的稳定性。
二、抗体的稳定性因素:
1. 温度
推荐条件：抗体通常在4℃和20℃保存，未添加甘油的液态抗体在4℃可保存一个月，添加甘油的在20℃可保存一年以上。<cite>8</cite>
冻干粉抗体：可在20℃、80℃或4℃保存多年，取用方便。<cite>8</cite>
2. 稳定剂
甘油：降低冰点，防止冻融，但不能使抗体在80℃不结冰。<cite>8</cite>
叠氮钠：作为防腐剂，防止微生物生长，但不适合活细胞和体内实验，且可能抑制HRP活性。
GBCBIO® Buffpro 300：适用于体外诊断试剂，具有高效抑菌和防腐效果。<cite>8</cite>
3. 浓度
推荐浓度：抗体在110mg/mL的浓度比较稳定。
分装：避免反复冻融，分装体积不小于10µl。
4. pH值和缓冲液
常用缓冲液：PBS、Tris、Hepes等。
保护剂：BSA、蔗糖、海藻糖等，根据抗体特性选择合适的存储溶液。<cite>1</cite>
三、抗体剪切应力稳定性
实验方法：
高速搅拌实验：分析抗体在高速搅拌条件下的纯度和构象变化。
震荡应力实验：评估抗体在不同频率和振幅下的理化性质变化。
泵循环实验：模拟生产和使用过程中的剪切应力，分析性质变化。
毛细管剪切实验：评估抗体在狭窄通道中的剪切稳定性。
剪切流变实验：测定流变学参数，评估剪切流动中的行为和稳定性。
界面剪切实验：分析抗体在界面上的吸附和变性情况。
四、抗体的浓度和保存方法
浓度：抗体浓度在110mg/mL范围内较稳定。
包装：选择低吸附材料的包装管，包装体积最小不小于10µl。
冻融：尽量避免反复冻融，使用防冻剂如甘油储存。
运输条件：模拟运输条件，测试稳定性。
五、抗体的稳定性改进
分子结构：抗体分子的高Tm值使其在5060度下仍能维持正确折叠。
纯度：高纯度的抗体产品去除了杂质，保证了稳定性。
浓度：高浓度减少容器表面吸附造成的物质损失。
技术改进：采用先进的抗体纯化技术，确保高纯度和稳定性。<cite>2</cite>
六、特殊抗体保存
流式抗体：不加甘油，4℃避光保存。
HRP标记抗体：加甘油，20℃保存，HRP底物4℃避光保存。<cite>8</cite>
即用型抗体：直接使用，建议4℃保存，不建议重复利用。<cite>8</cite>
七、抗体批次间稳定性
选择：选择经过验证的抗体，看验证结果和客户评价。
稳定性：王牌抗体公司（如CST、Abcam）的稳定性较好。<cite>5</cite>
保存液：含有叠氮化钠、甘油等的保存液便于长期使用。
八、抗体的使用和保存
滴定测试：每使用新批次抗体时进行滴定测试。
同型对照：注意区分人和鼠抗体，避免混淆。
实验步骤：避免忘记加Fc阻断试剂，确保实验成功。
阳性细胞群：确保抗体质量，阳性细胞群清晰可见。
九、抗体的稳定性与实验可重复性
验证结果：选择经过特定实验证实有效的抗体。
客户评价：参考抗体使用者的评价和实验经验。
性价比：比较不同公司同一抗体的价格和质量。
通过上述方法和注意事项，可以确保抗体在不同条件下的稳定性，从而提高实验的可重复性和准确性。
