聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR)是利用一段DNA为模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物共同参与下，将该段DNA扩增至足够数量，以便进行结构和功能分析。PCR检测方法在快速诊断细菌性传染病等方面具有极为重要的意义。PCR为最常用的分子生物学技术之一。至今在世界范围内都有广泛的应用，作为生物学实验的一个重要的方法，其有着不可估量的作用。
简单来说分为以下三个步骤：
1、DNA变性，加热使靶DNA序列双链解离成单链DNA。
2、引物与靶DNA退火，适当降低温度，使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。
3、引物延伸，在DNA聚合酶的催化下，引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后，又可作为模板与引物杂交，并且在DNA聚合酶的催化下，引导合成新的靶DNA链。如此反复进行以上3个步骤，即可使靶DNA片段指数性扩增。
具体操作步骤如下：
1、在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2、调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，最后在72℃ 保温7min。
3、结束反应。PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4、PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
虽然，PCR技术已经相当成熟，但对于一个传统实验室，不但要满足高科技的实验设备，合理的空间布局等基本条件，一般还具有人员素质专业性高、管理严谨度高、投入成本高、结果责任性高等特点。
